AB/PAS染色及CK20表达在胃癌诊断中的应用价值

发布日期：2012-05-17 14:13:23点击次数：5032

AB/PAS染色及CK20表达在胃癌诊断中的应用价值

张丹¹，韩亚京²

（1.北京首钢医院消化科，2.北京大学第三医院消化病理室，北京，100191）

目的：研究AB/PAS染色及CK20表达在胃癌诊断中的应用价值。方法：应用AB/PAS染色观察胃癌组织中的粘液分泌情况，同时应用免疫组织化学法研究胃癌组织中CK20的表达情况。结果：胃癌组织中AB/PAS的染色及CK20的表达阳性率与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度及淋巴结转移无关(P>0.05)，而与肿瘤的分化有关(P<0.05)； AB/PAS染色的阳性率与CK20 的阳性表达呈正相关( r =0.489 , P = 0.018) ；结论：AB/PAS的染色及CK20的表达阳性率与胃癌组织的分化程度相关， AB/PAS染色和CK20有助于的胃癌的诊断及发展的判断。

关键词： AB/PAS，CK20，胃癌

Evaluation of AB/PAS and CK20 expression in the diagnosis of gastric cancer 　

胃癌在全世界范围内发生率和死亡率在过去几年已经有所下降，然而其发生率仍处于肿瘤中的前四位，5年生存率仍低于20%，是恶性肿瘤死亡的主要疾病之一[1]。我国作为胃癌发病率较高的国家，对胃癌的防治极为重视，因此早期预防、早期诊断、早期治疗及随访均非常重要。研究和寻找有关胃癌诊断、转移及复发的生物学标记物具有重要意义。胃粘膜肠化生作为一种常见的病理现象，其与胃癌发生之间的关系是当今病理学研究的热点，无论是胃癌组织中，还是癌旁的化生组织中，黏液染色均可对诊断提供帮助。我们应用AB/PAS染色及CK20研究胃癌发生、发展情况，探讨其与胃癌的临床特征及生物学行为之间的关系。

一、病例及方法

1、病例选择：收集2006年1月～2010年7月临床资料较完整的胃癌常规石蜡包埋组织标本23例（胃粘液癌、管状腺癌等），其中男16名，女7名，年龄46岁～91岁，平均年龄70岁；高分化腺癌5例，中分化腺癌7例，低、未分化腺癌11例；同时选用胃炎病人胃活检病例20例作为对照。

2、方法与材料：

2.1黏液组化染色：组织用10%福尔马林固定，石蜡包埋，制成5mm厚的切片，分别进行常规HE染色，用于病理诊断，用黏液染色试剂盒I(北京世济合力生物科技有限公司)进行AB/PAS染色。

2.2 CK20免疫组化：取存档蜡块 4μm连续切片，作免疫组化染色。染色步骤按PV-9000试剂盒说明书进行（北京中杉金桥生物技术有限公司），染色前均用高压修复组织抗原，用PBS代替一抗作阴性对照，阳性结果判定：有棕褐色或棕黄色着色为阳性。CK20无着色者为阴性；阳性细胞<10%为弱阳性，10%≤阳性细胞<50%为阳性；≥50%为强阳性。

3统计学处理：

用SPSS11.0统计软件处理，采用t检验、x²及相关性检验，P<0.05时差异有统计学意义。

表1：癌组织中AB/PAS与CK20的表达与胃癌的临床病理关系

项目统计	n 23	AB/PAS		CK20
		阳性	阴性	阳性	阴性
年龄（岁）	6 17	3(50) 3(50) 15(88.24) 2(11.76)		4(50) 2(50) 14(82.35) 3(17.65)
≤60
＞60
性别	16 7	13(81.25) 3(18.75) 5(71.43) 2(28.57)		13(81.25) 3(18.75) 5(71.43) 2(28.57)
男
女
肿瘤大小	8 12 3	7(87.5) 1(12.5) 9(75) 3(25) 2(66.67) 1(33.33)		8(100) 0 9(75) 3(25) 1(33.33) 2(66.67)
小于2cm
2-5cm
5cm以上
分化	5 7 11	1(20) 4(80) 7(100) 0 10(71.43) 1(28.57)﹡		1(20) 4(80) 6(85.71) 1(14.29) 11(100) 0﹡
高
中
低
浸润深度局限于黏膜黏膜下、肌层	16 7	12(75) 4(25) 6(85.71) 1(14.29)		11(68.75) 5(31.25) 7(100) 0
无转移转移	21 2	17(80.95) 4(19.05) 1(50) 1(50)		16(76.19) 5(23.81) 2(100) 0

﹡p<0.05

表2、胃癌中AB/PAS与CK20表达的关系

	AB/PAS(+)	AB/PAS(-)	总计
CK20(+)	16（69.6）	2（8.7）	18
CK20(-)	2（8.7）	3（13）	5
总计	18	5	23

r=0.489, P=0.018

二、结果：

1、AB/PAS染色及CK20的表达阳性率与胃癌的关系(表1)：癌组织中AB/PAS染色及CK20阳性率与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度及转移无关(P>0.05)，而与胃癌的分化有关(P<0.05)；随着癌分化程度的降低，AB/PAS染色阳性率亦增高，5例高分化腺癌中1例阳性(20%)，而且仅在非典型增生的胃粘膜存在；中分化腺癌7例都为阳性，阳性率100%；低、未分化腺癌11例，有10 例阳性，阳性率71.43%；P<0.05，差异有统计学意义。癌组织浸润至黏膜下、肌层者有7例，其中6例AB/PAS染色阳性，阳性率为85.71%。CK20 的阳性表达主要位于细胞质和细胞膜。癌组织中CK20的表达与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度及转移无关(P>0.05)；而与胃癌的分化有关(P<0.05)。5例高分化腺癌中1例阳性(20%)；中分化腺癌7例中6例CK20表达为阳性，阳性率85.71%；低、未分化腺癌11例均为阳性，阳性率100%；P<0.05，差异有统计学意义；随着癌分化程度的降低CK20的表达而增强。癌组织浸润至黏膜下、肌层及淋巴结转移者CK20均呈阳性表达(100%)。

2、癌组织中AB/PAS染色阳性与CK20的表达呈正相关(r=0.489)(表2)。

3、正常对照中仅见正常胃粘膜上皮部分表达CK20，正常胃粘膜中AB/PAS染色均为阴性。

三、讨论：

胃粘膜肠化生是一种常见的病理现象，其与胃癌发生之间的关系是当今病理学研究的热点，研究发现含有大量硫酸化粘液的肠化生与胃癌有关，属于癌前病变[2、3]。在胃粘膜肠上皮化生与胃癌发生之间的关系研究中，黏液组织化学染色起着重要作用[4]。AB/PAS对于具有粘液分泌的肿瘤具有很大的诊断价值，尤其在一些分化较低的肿瘤临床上无法区分诊断时，可以用黏液染色方法作为辅助的诊断与鉴别诊断方法。在消化系统肿瘤中，尤其是胃肠道肿瘤发现肠化生之杯状细胞AB染色强阳性，而无肠化生处呈中性粘液阳性，粘液腺癌其癌旁肠化生腺体重度硫酸粘液染色与粘液化之重度AB/PAS阳性相一致[5]。AB/PAS染色对于粘液腺癌及其它各种低分化癌的诊断具有重要价值，尤其是在一些转移性肿瘤来源诊断困难时，AB/PAS染色可以起到很好的作用。

CK20分子质量为46KDa，含424个氨基酸残基，具有I型角蛋白的特征，但不与其它I型角蛋白的单抗发生交叉反应[6、9]。它在细胞发生根本性改变时(如恶性转化、侵袭、肿瘤转移等)可继续合成，仅在部分器官上皮细胞及一些特异表型的肿瘤中表达：胃肠道黏膜上皮细胞、尿道上皮细胞、表皮 Merkel细胞等[7]，绝大多数其他人体组织，包括肺脏、肝脏呈阴性分布，其他非上皮细胞或组织，如平滑肌、血细胞、淋巴结及其他单层上皮型细胞角蛋白偶尔有表达的肿瘤也无CK20表达，因而它被广泛应用于肿瘤诊断的许多方面的研究[8]。

我们应用AB/PAS与CK20共同对胃癌组织进行染色观察，结果发现CK20在胃癌中有较高的表达(78.26%)，高于文献报道[9]，并且组织中CK20的强度随着癌组织分化程度降低而表达增强，显示CK20的表达可能与胃癌的分化程度有关。研究发现，应用AB/PAS染色发现大多数胃癌中存在AB/PAS染色阳性(78.26%)，并且AB/PAS染色阳性率与肿瘤组织的分化有关随着癌分化程度的降低，AB/PAS染色阳性率增高；癌组织浸润至黏膜下、肌层者有7例，其中6例AB/PAS染色阳性，阳性率为85.71%。实验中发现虽然AB/PAS染色阳性率虽然肿瘤浸润深度及转移无统计学意义，但所观察发现癌组织浸润至黏膜下、肌层及淋巴结转移者AB/PAS染色及CK20表达均呈阳性，这就提示我们AB/PAS染色及CK20对肿瘤生物学行为的判断有一定的帮助。对于而CK20阴性的癌组织中也可发现AB/

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