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背景资料
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AP（Alkaline Phosphatase,，碱性磷酸酶）属于同源二聚体蛋白，分子量为56KDa。碱性磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的酶，即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基，这类底物包括核酸、蛋白、生物碱等。而该脱去磷酸基团的过程被称为去磷酸化或脱磷酸化。碱性磷酸酶也是目前免疫诊断试剂产品最常用的标记酶之一。与辣根过氧化物酶（HRP)相比，AP用作标记酶的优点是：稳定性高、灵敏度高，缺点是成本高，标记困难。碱性磷酸酶的色原底物最常用的是对硝基苯磷酸盐(pNPP)。pNPP在碱性磷酸酶的作用下生成对硝基酚(pNP)，其在405nm处有最大吸收。BCIP/NBT也是碱性磷酸酯酶的常用底物。在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
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