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慢病毒载体构建、包装、纯化、鉴定

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品牌:威斯腾生物

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威斯腾生物技术服务中心
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  • 威斯腾生物技术服务中心是一家从事生命科学研究、产品开发和实验技术服务的专业机构,目前主要从事基因诊断试剂的研发以及分子生物学、细胞生物学和免疫学相关领域的技术服务。我们的宗旨是:加强学术交流,推动科研发展,科学,严谨,求实,专业。现推出如下实验技术服务:
    我中心可以为广大科研朋友提供慢病毒载体构建,腺病毒载体的构建,腺病毒的扩增,包装,纯化。以及慢病毒的包装和纯化。基因的过表达,以及RNAI相关的研究。
    1、慢病毒的简介: Lentivirus 是逆转录病毒 的一种,具有逆转录病毒基本结构和特性;能整合入宿主 细胞基因组,长期表达可用于转动物制备;但也有不同逆录病毒的分和特性比逆转录病毒具有更高的滴度,不仅可以感染分裂细胞重要是还能非。 比逆转录病毒具有更高的滴度,不仅可以感染分裂细胞重要是还能非。 比逆转录病毒具有更高的滴度,不仅可以感染分裂细胞重要是还能非。 利用 Lentivirus 构建的 shRNA 表达载体,与化学合成的 表达载体,与化学合成的 siRNA 和基于瞬时表达载体构 建的 shRNA 相比, 一方面可以替代后者另Lentivirus -shRNA 载体经包 装系统装后,可用于感染依靠传统转试剂难的细胞(如原代、悬浮等),并且在 装后,可用于感染依靠传统转试剂难的细胞(如原代、悬浮等),并且在 感 染后可以整合到受细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备细胞的基因组,进行长时间稳定表达 是制备shRNA 细胞 株和进行体内实验 (in vivo) 的最有效手段。 目前我们能够为客户提供从载体构建到慢病毒包装纯化和检测的一站式服务; 同时公 司还在高效慢病毒生产技术的基础上建立并完善了载体制备转因动物实验。
    2、慢病毒载体构建包装实验流程如下:

    1. 根据目的基因相关信息(序列,号等),构建含有外源或重组载 根据目的基因相关信息(序列,号等),构建含有外源或重组载 根据目的基因相关信息(序列,号等),构建含有外源或重组载 根据目的基因相关信息(序列,号等),构建含有外源或重组载 根据目的基因相关信息(序列,号等),构建含有外源或重组载 体;
    2. 对于测序正确的重组质粒,提取和纯化高量(不含内毒素);
    3. 使用高效重组载体和慢病毒包装质粒共转染 29 3T 细胞,进行病毒包装并收集上清 液;
    4. 通过超滤和速离心浓缩纯化病毒;
    5. 用病毒液感染 293T 细胞,测定病毒滴度;
    用高质量 的病毒液感染靶细胞,通过定PCR 或者 Westenblot 检测目的基因表达,也可以 进一步行稳定细胞株的筛选用于长期功能学研究。

    3、 RNAi 与慢病毒载体技术服务:
    近年来的研究表明,将与 mRNA 对应的正义 RNA 和反义 RNA 组成的双链 RNA(dsRNA) 导入细胞, 可以使 mRNA 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 发生特异性的降解,导致其相应基因沉默。这种转录后机制 (PTGS) 被称为 RNA 干扰( 干扰( RNAi )。通过构建 )。通过构建 )。通过构建 )。通过构建 RNAi 表达载体制备 shRNA( 发卡结构小干扰 RNA) ,已成为进 ,已成为进 ,已成为进 行RNA 干扰实验的常用手段之一。 而目前为了感染原代细胞和难的系或者在动物水 平进行 RNAi ,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。在 ,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。在 ,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。在 ,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。在 ,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。在 ,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。在 ,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。在 ,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。在 ,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。在 ,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。在 ,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。在 RNAi 的研究中,为了感染原代细胞和 的研究中,为了感染原代细胞和 的研究中,为了感染原代细胞和 的研究中,为了感染原代细胞和 的研究中,为了感染原代细胞和 的研究中,为了感染原代细胞和 的研究中,为了感染原代细胞和 的研究中,为了感染原代细胞和 难感染的细胞系,科学家开始借助于病毒载体实现 难感染的细胞系,科学家开始借助于病毒载体实现 RNAi ;由于慢病毒可以同时感染分裂和非 ;由于慢病毒可以同时感染分裂和非 ;由于慢病毒可以同时感染分裂和非 ;由于慢病毒可以同时感染分裂和非 ;由于慢病毒可以同时感染分裂和非 ;由于慢病毒可以同时感染分裂和非 ;由于慢病毒可以同时感染分裂和非 ;由于慢病毒可以同时感染分裂和非 ;由于慢病毒可以同时感染分裂和非 分裂细胞、整合性以及免疫原低等优点,目前在 RNAi 的 研究中,基于慢病毒构建shRNA 被最广泛的使用。
    本中心常期承接 本中心常期承接 慢病毒, 腺慢病毒, 腺慢病毒, 腺慢病毒, 腺RNAiRNAiRNAiRNAi,WB ,QPCRQPCRQPCRQPCR,RT -PCRPCRPCR,EMSAEMSAEMSAEMSA, 蛋白表达, 抗体制备组学质谱分析基因芯片蛋白表达, 抗体制备组学质谱分析基因芯片蛋白表达, 抗体制备组学质谱分析基因芯片蛋白表达, 抗体制备组学质谱分析基因芯片蛋白表达, 抗体制备组学质谱分析基因芯片micmicmicroRNAoRNAoRNAoRNA研究系列,原代培养动物实验鸭乙肝新药 筛选心脑血管病研究系列,原代培养动物实验鸭乙肝新药 筛选心脑血管病研究系列,原代培养动物实验鸭乙肝新药 筛选心脑血管病研究系列,原代培养动物实验鸭乙肝新药 筛选心脑血管病研究系列,原代培养动物实验鸭乙肝新药 筛选心脑血管病研究系列,原代培养动物实验鸭乙肝新药 筛选心脑血管病研究系列,原代培养动物实验鸭乙肝新药 筛选心脑血管病研究系列,原代培养动物实验鸭乙肝新药 筛选心脑血管病研究系列,原代培养动物实验鸭乙肝新药 筛选心脑血管病研究系列,原代培养动物实验鸭乙肝新药 筛选心脑血管病研究系列,原代培养动物实验鸭乙肝新药 筛选心脑血管病研究,新药理学 实验以及医研究,新药理学 实验以及医研究,新药理学 实验以及医研究,新药理学 实验以及医研究,新药理学 实验以及医研究,新药理学 实验以及医SCI 相关翻译、修改代投服务等 相关翻译、修改代投服务等 相关翻译、修改代投服务等 相关翻译、修改代投服务等 相关翻译、修改代投服务等 。
    更多实验技术服务请见中心网站,或来电询洽!

     本平台常期承接:
           慢病毒,腺病毒,RNAi类,细胞生物学整体实验,骨髓间充质干细胞培养、心肌细胞培养,蛋白组学类(iTRAQ),裸鼠成瘤类,分子生物学类,抗体制备类,芯片类,病理类,整体课题等各项实验技术服务。
            以及课题设计,基金标书撰写,医学SCI评估、翻译、润色以及协助发表。

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